低溫超薄切片機(jī)是制作細(xì)胞或組織切片的機(jī)器,用于光學(xué)顯微鏡的有旋轉(zhuǎn)式和滑走式切片機(jī)。用于電子顯微鏡的有低溫超薄切片機(jī),使用玻璃刀或鉆石刀制作超薄切片。材料的裝置有機(jī)械推進(jìn)式和熱膨脹式。用于冷凍切片法的有冷凍切片機(jī)、低溫恒溫器、冷凍超薄切片機(jī)。
冷凍切片是利用物理降溫的方法將新鮮的組織標(biāo)本冷凍使其產(chǎn)生一定的硬度進(jìn)行切片的技術(shù)方法。由于無需脫水包埋,因此與石蠟切片相比制片速度快,是為手術(shù)進(jìn)行中的臨床醫(yī)師提供病理診斷的良好方法。
此外由于冷凍切片的標(biāo)本是未經(jīng)固定的新鮮組織,因此冷凍切片也是脂肪染色、酶組織化學(xué)染色以及某些免疫組織化學(xué)染色和原位分子雜交的理想制片方法。冷凍切片的不足是組織細(xì)胞的形態(tài)略遜于石蠟切片。
組織從生物活體取下以后,如果不立即進(jìn)行適當(dāng)處理,會(huì)由于細(xì)胞內(nèi)部各種酶的作用,出現(xiàn)細(xì)胞自溶現(xiàn)象。此外,還可能由于污染,微生物在組織內(nèi)繁殖使細(xì)胞的微細(xì)結(jié)構(gòu)遭受破壞。
因此,為了使細(xì)胞結(jié)構(gòu)盡可能保持生前狀態(tài),要做到快、小、準(zhǔn)、冷:
1、動(dòng)作迅速,組織從活體取下后應(yīng)在短時(shí)間內(nèi)(爭(zhēng)取在1分鐘內(nèi))投入2.5%戊二醛固定液。
2、所取組織的體積要小,一般不超過1mm×1mm×1mm。也可將組織修成1mm×1mm×2mm大小長條形。因?yàn)楣潭▌┑臐B透能力較弱,組織塊如果太大,塊的內(nèi)部將不能得到良好的固定。
3、機(jī)械損傷要小,解剖器械應(yīng)鋒利,操作宜輕,避免牽拉、挫傷與擠壓。
4、操作要在低溫(0℃~4℃)下進(jìn)行,以降低酶的活性,防止細(xì)胞自溶。
5、取材部位要準(zhǔn)確。